微生物限度测试
一、实验目的
用于测定抗菌产品体外抑制细菌生长效力的试验,也称为抑菌试验。通过该实验,可以测定其最低抑菌浓度,用以评价该产品的抑菌性能,这是抗菌产品的最基本的效力数据。
二、菌种选择
美国化妆品、洗涤剂和香精协会(CTFA)推荐的菌种,是极具代表性的,按CTFA标准做微生物挑战试验通过,全世界公认3年保质期。
类别 |
名称 |
属性 |
特点 |
对皮肤的潜在威胁 |
细菌 |
E.Coli (大肠杆菌) |
革兰氏阴性 |
发酵乳糖产酸并产气,需氧或兼性厌氧菌 |
引起皮肤继发性感染 |
S.Aureus (金黄色葡萄球菌) |
革兰氏阴性 |
血浆凝固酶阳性,产酸不产气,需氧或兼性厌氧球菌 |
引起脓胞疮、毛囊炎、疖等严重的有皮肤烫伤样皮炎症状 |
P.Aeruginosa (绿脓杆菌) |
革兰氏阴性 |
氧化酶阳性,产生绿脓菌素。还能液化明胶,还原硝酸盐为亚硝酸盐,专性需氧菌 |
入眼可引起角膜化脓性溃疡,入伤处可化脓;屏障破坏引起皮肤感染;严重可引起败血症 |
真菌 |
C.Albicans (白色念球菌) |
酵母菌 |
可发酵产酸,分泌毒素,兼性厌氧型菌 |
引起皮肤过敏性皮炎及多种真菌性皮肤病 |
A.Niger (黑曲霉) |
霉菌 |
霉菌产生霉斑,有霉臭味,为需氧型真菌 |
引起皮肤过敏性皮炎及多种真菌性皮肤病 |
三、实验方法
方法1. 微量肉汤稀释法
实验原理:最小抑菌浓度(MIC):抑制微生物生长所需的最低浓度,根据MIC值大小判断抑菌效力。
实验步骤:将防腐剂加入液体培养基(如肉汤)中,用等系列稀释法稀释防腐剂成不同浓度的液体,接种微生物并进行培养,观察微生物生长情况。
评价标准:微生物未生长时防腐剂浓度,即为最小抑菌浓度。MIC值越小,代表该物质的抑菌效果就越好。
A
M0 代表肉汤中加入防腐剂和菌液,共培养前;
M1 代表培养后,防腐剂浓度大于0.06后,溶液均澄清;
结果分析:该产品MIC值为0.06
方法2.纸片扩散法(K-B法),E试验--抑菌圈测试、抑菌带测试
实验原理:是评价一种防腐剂抑菌作用的最简单的实验的方法,根据抑菌圈大小判断抑菌效力。
实验步骤:试验细菌或霉菌在适合的培养基上, 经培养后能旺盛生长。若培养基平板中央放有经防腐剂处理的滤纸圆片向周围渗透, 可形成抑菌圈。量出抑菌圈直径的大小, 可以判断出防腐剂的效力。
评价标准:抑菌圈直径越大, 表明防腐剂的效力越好。
微生物鉴别测试
微生物对化妆品的污染,不仅影响产品本身的质量,而更严重的是它危及消费者的健康和安全。因此世界各国极为重视,各国都制定了化妆品中微生物的卫生标准,将化妆品中微生物的污染状况作为产品的一个质量指标,在各国关于化妆品中微生物的第二项指标是,化妆品中不得含有致病菌。
关于致病菌的定义在微生物学中应是很清楚的,但其内涵所包括的细菌是很广的。而在化妆品中的微生物这项指标中,所指的致病菌包括致病菌和条件致病菌。
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世界卫生组织WHO规定的特定菌为2种:绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌。
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欧洲一些国家的特定菌为3种:绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌。
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我国规定的的特定菌为3种:绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、粪大肠菌群。
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日本规定的的特定菌为3种:绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠菌群。
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美国规定的的特定菌为10种:绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、克雷伯氏菌、沙门氏菌、变形杆菌、嗜麦芽假单胞菌、多嗜假单胞菌、无哨不动杆菌、粘质沙雷氏菌。
一、广曼微生物研究所拥有完善的菌种库,通过多种鉴定方法,帮客户进行菌种鉴定。
二、微生物处理解决方案及企业消杀服务
广曼拥有自己的微生物实验室研发和检测团队,本着“让世界绽放致臻至美”的使命,提供制定专业优质的消杀处理服务。
(1)追溯微生物感染源头
常规鉴定内容有形态特征和理化特性。形态特征包括显微形态和培养特征:理化特性包括营养类型、碳氮源利用能力、各种代谢反应、酶反应和血清学反应等。
(2)微生物长期监测
根据客户生产过程中出现的的不同微生物污染问题,采用菌种分离纯化及鉴定技术对菌种进行鉴定,对生产现场、原包材进行取样分析,排查污染源,针对抑制污染菌种及消除污染源提供不同解决方案。并对工厂生产环境,对空气、设备、水供给系统进行日常消杀处理,为工厂提供良好生产环境。最大程度上降低微生物污染的风险,给客户提供最安心的服务。